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鱼特定基因序列PCR检测试剂盒说明书

产品时间:2019-05-17

简要描述:

鱼特定基因序列PCR检测试剂盒说明书中含有聚合酶链式反应所需要各种试剂组分,如:引物、dNTPs、缓冲液、Taq酶等,PCR反应液混合液中加入检测样品,即可进行PCR扩增反应。PCR扩增产物经琼脂糖电泳染色判断,阳性样本将在相应大小的片段处出现特异性条带。

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规格及成分:
产品名称成 十孔盒包装
MMLV 逆转录酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀剂 50903 400 μL
TdT(末端转移酶) 120312 10 μL
2×TdT Buffer(含 dATP 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0(含染料) 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 80403 1 mL
使用手册 101105sc 1
产品名称:鱼特定基因序列PCR检测试剂盒说明书
规格:50T
编号:BH-P4560
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 6 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 65432 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,最大吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500nm,最大发射光谱在 530nm
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
注意事项:
加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物AB液时,避免使用带金属部分的加样器
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
Ca Ski(人上皮细胞) 5×106cells/瓶×2孔雀石绿质量规格:BSMalachite green

FCAR Others Human FCAR / CD89 人细胞裂解液 (阳性对照) 灿烂绿,亮绿质量规格:BSBrilliant green

tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B);F9-CAG-tTA-3A1酸洗石棉质量规格:ARAsbestos acid washed

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 苊(标准品)质量规格:分析标准品,99.5%(GC)Acenaphthene

Lewis 肺癌铝标准溶液(1000μg/ml,介质:1.0 mol/L HNO3)质量规格:1000μg/ml,介质:1.0 mol/L HNO3Aluminum solution
EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8降钙素,人Calcitonin, human质量规格:>95%,BR

EFNA3 Others Human EphrinA3 / EFNA3 人细胞裂解液 (阳性对照) 降钙素,大鼠Calcitonin, rat质量规格:>95%,BR

人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;C918降钙素基因相关肽(8-37),人Calcitonin Gene Related Peptide (8-37), human质量规格:>95%,BR

NRP2 Others Human Neuropilin 2 / NRP2 人细胞裂解液 (阳性对照) 降钙素基因相关肽Ⅱ,人Calcitonin Gene RelatedPeptide II, human质量规格:>95%,BR

CM-R058大鼠膀胱上皮细胞完全培养基100mL降钙素基因相关肽,大鼠Calcitonin Gene RelatedPeptide, rat质量规格:>95%,BR
鱼特定基因序列PCR检测试剂盒说明书SF767细胞,人脑瘤细胞 阴沟肠杆菌 人主动脉内皮细胞总RNAHAEC NA甲硫咪唑硫代-β-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口Methimazole Thio-β-D-glucuronide

RKO-E6(人结肠癌转基因细胞) 5×106cells/瓶×2美洛西林质量规格:美国进口Mezlocillin

GBC-SD(人胆囊癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0312293ET(人胚肾细胞(SV40TEBNA1基因修饰细胞))5×106cells/瓶×2 盘羊皮肤细胞;ASHS3二去甲基米非司酮质量规格:美国进口Didemethyl Mifepristone

小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-122-羟基米非司酮质量规格:美国进口22-Hydroxy Mifepristone

16. 细胞系统甲基4-羟基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物质量规格:美国进口Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide

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